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免疫層析分析技術快速檢測穀物中的黃曲黴(méi)B1
時間:2014-07-31 17:40:19 作者:管理(lǐ)員 來源: 點擊:1169次

黃曲(qǔ)黴毒素 B1(Aflatoxin B1 簡寫為 AFB1)是目前已知的化學物質中致癌性最強的一(yī)種。黃曲黴毒素(sù) B1 對人和若幹動物具有強烈的毒性,其毒性作用主要是對肝髒的損害。國家質檢總局規定黃曲黴毒素 B1 是大部分食品的必檢項(xiàng)目之一。

本品采用高度特異性的抗體抗原反(fǎn)應及免疫層析分析(xī)技術(shù),通過單克隆抗體競爭結合 AFB1-BSA 偶聯(lián)物和樣品中可能含有的 AFB1 的原理。試劑含有被事先固定於膜上測(cè)試區(T)的 AFB1-BSA 偶聯物和被膠體(tǐ)金標記的抗(kàng) AFB1 單克隆抗體。

實驗方法:

一、樣品製備

取 5g 以上有代表性(xìng)樣品並粉碎過 20 目(mù)篩,準(zhǔn)確稱取 2.0g 均(jun1)勻粉碎試樣於配套離心管中,再準(zhǔn)確加入(rù) 4ml 純淨水和 4.0ml 乙酸(suān)乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩 5min。4000rpm 離心 1min 得上清液,將上清液用吸管移出 2.0ml 到蒸發皿或小玻璃杯中,用(yòng)電吹風吹幹上清液。根據樣品的種類按以(yǐ)下規(guī)定的稀釋液量,用(yòng)鋁箔袋內配套吸管(guǎn)反複衝洗,徹底溶解杯底所有的固體,此溶解液為樣品提取液即檢測液(yè)。考慮不同樣品(pǐn)對黃曲黴毒素 B1 的最高(gāo)含量要求,請參考下表(biǎo)進行用稀(xī)釋液溶解杯底固(gù)體:

二、實驗步驟

1. 在進行檢測前先完整(zhěng)閱讀使用說(shuō)明書,使用前將試紙卡和待檢樣本溶解恢複至室溫;

2. 從原包裝袋中取出(chū)試紙卡,打開後平放在桌(zhuō)麵上,請在 1 小(xiǎo)時內盡快使用;

3. 用吸(xī)管吸取待檢樣品溶液,滴加 3 滴於(yú)加樣孔中,加樣後開始計時;

4. 結果應在 10min 內(nèi)讀取,超過 12min 的時間判讀無效。

三、結(jié)果判(pàn)定

1. 陽性:位置 C 顯示出紅色線條,而位置 T 不(bú)顯色時,或者位置 C 顯(xiǎn)示出紅色(sè)線條(tiáo),位置(zhì) T 顯示顏(yán)色非(fēi)常模糊時,判為陽性。陽性結果(guǒ)表(biǎo)明:AFB1 含量超過樣品允許量。

2. 陰性:位置 C 顯示(shì)出紅色線條,位置 T 同時顯示出紅色線條,且 T 線(xiàn)顏色接近 C 線或者深於 C 線時,判為陰性。陰性結果表(biǎo)明:AFB1 含量低於

樣品允許量。

3. 無效:位置 C 不顯示出紅色(sè)線條,而位置 T 顯(xiǎn)示出紅色線條(tiáo),該試紙卡視為無效。建議使用新的試紙卡按本說明書(shū)要求重新測試。


本文關(guān)鍵詞(cí):免疫層析(xī)分析技術 快(kuài)速檢測 穀(gǔ)物 黃曲黴B1

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