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免疫(yì)層析(xī)分析技術快(kuài)速檢測(cè)穀物中的黃曲黴B1
時(shí)間:2014-07-31 17:40:19 作者:管理員 來源: 點(diǎn)擊:1218次

黃曲(qǔ)黴毒素 B1(Aflatoxin B1 簡寫為 AFB1)是目前已知的化學物質中致癌性最(zuì)強的(de)一種。黃曲黴毒素 B1 對人和若幹動物具有強烈的毒性,其毒性作用主要是對肝髒的損害。國家質檢總局規定黃曲黴毒素 B1 是大部分食品的必檢項目之(zhī)一。

本品采用高度(dù)特異性的抗體抗原反(fǎn)應及免疫層(céng)析分析技術,通過單克隆抗體競爭結合 AFB1-BSA 偶聯物和樣品中可能含有的 AFB1 的原理。試劑(jì)含有被事先固定於膜上測試區(T)的(de) AFB1-BSA 偶聯物和被膠體金(jīn)標(biāo)記的抗 AFB1 單克(kè)隆抗體。

實驗方法:

一、樣品製備(bèi)

取(qǔ) 5g 以上(shàng)有代表性樣品並粉碎過(guò) 20 目篩(shāi),準確稱取 2.0g 均勻粉碎試樣(yàng)於配套離心管中,再準確加入 4ml 純淨水和 4.0ml 乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩 5min。4000rpm 離心(xīn) 1min 得上清液,將上清液用吸管移出 2.0ml 到蒸發皿(mǐn)或小玻璃杯中,用電吹風吹幹上(shàng)清液。根據樣品的種類按以下規定的稀釋(shì)液量,用鋁箔袋(dài)內配套吸管反複衝洗,徹底(dǐ)溶解杯底所有的固體,此溶(róng)解液為樣品提取液即檢測液。考慮不同樣品對黃(huáng)曲黴毒(dú)素 B1 的最高含量要求,請參考下表進行用稀釋液溶解(jiě)杯底(dǐ)固體:

二(èr)、實驗步驟

1. 在(zài)進行(háng)檢測前先完整閱讀使用說明書,使用前將試紙(zhǐ)卡和待檢樣本溶解恢複至室溫;

2. 從原包裝(zhuāng)袋中取出試紙卡,打開後平(píng)放(fàng)在桌麵上(shàng),請在 1 小時內盡快使用;

3. 用吸管吸取待檢樣品溶液,滴加 3 滴於加樣孔中,加樣後開始計時(shí);

4. 結果應在 10min 內讀(dú)取,超過 12min 的時間(jiān)判讀無效(xiào)。

三、結果(guǒ)判定

1. 陽性:位置 C 顯示出紅色線條,而位置 T 不顯色時,或者位置 C 顯示出紅色線條,位置 T 顯示顏色非常模(mó)糊時(shí),判為陽性。陽性結果表明:AFB1 含量(liàng)超過樣品(pǐn)允許量。

2. 陰(yīn)性:位置 C 顯示出紅(hóng)色線條,位置 T 同時顯(xiǎn)示出紅色線條(tiáo),且 T 線顏色接近 C 線或者深(shēn)於 C 線(xiàn)時,判(pàn)為陰(yīn)性。陰性結果表明:AFB1 含量低於(yú)

樣品允許量。

3. 無效:位置(zhì) C 不顯示出紅(hóng)色線條,而位(wèi)置 T 顯示出紅色線條(tiáo),該試紙卡視為無效。建議使用(yòng)新的試紙卡按本說明書(shū)要求重新測試。


本文關鍵詞:免疫層析分析技術 快速檢測 穀物 黃曲黴B1


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