北京(jīng)智雲達科技股份有限公司 | |
郵 編: | 15810687836 |
電(diàn) 話: | 4006-099-690 |
網 址: | www.cnhuinu.com |
公司地址: | 北京市(shì)海澱區中關村和盛大(dà)廈 |
維生(shēng)素C又叫抗壞血酸(Ascorbicid),廣泛存在於植物組織中,新鮮的水果、蔬菜中含量較多。是一(yī)種水溶性(xìng)小分子(zǐ)生物(wù)活性物質(zhì),也是人體需要量最大的一種(zhǒng)維生素。維生素C具有還原性(其結構式如圖1),可以與許多氧(yǎng)化劑發生(shēng)氧化還(hái)原反應,因此可以利用其還原性測定維(wéi)生素C的含量(liàng)。目前食品中測定維(wéi)生素C含量的方法主要有碘量法,是利(lì)用維生素C的氧化還原性為基礎的一種氧化還原方(fāng)法。岡其酸(suān)度不易把握,碘(diǎn)需要標定且易揮發,而Vc不易穩定(dìng)保存,使測定結(jié)果易出現偏差,且這種方法不適合微量分析;國標GB/T6195-1986是采用2,6一二(èr)氯靛酚滴(dī)定法。利用(yòng)樣品溶液由藍(lán)色轉變為粉紅色來辨別其(qí)滴定終點的到達。但是多數水果、蔬菜樣品(pǐn)其(qí)提(tí)取液都(dōu)具有一定的色澤而導致滴定終(zhōng)點不(bú)明顯,使測定(dìng)準確度降低。另外還有熒光(guāng)光譜分析法 J、紫外一可見分光度法(fǎ)、色譜法、電化學法等,這些方法都存在著一定的局限性,如操(cāo)作過程複(fù)雜,所用試劑不穩定,速度慢、背景¨幹擾大(dà)。近年來,建立的測(cè)定Vc的其(qí)他方(fāng)法(fǎ)還(hái)有催(cuī)化(huà)動力(lì)學和光度法相結合的方法,及VC傳感器測定(dìng)方法,固定pH滴定法等。
該論文將對蔬菜、水果常用的維生(shēng)素C含(hán)量的檢測方法進行綜述、比較。
1原子吸收分光光度法
利用原子吸收分(fèn)光光度法問接測定維生素C的含量(liàng),是(shì)利用維生素C可以與一些金屬離子發生氧化還原反應,通過測定反應掉的金屬離子的量,進而間接計算(suàn)出(chū)維生素c的含量。
1.1以銀離子作為氧化劑的間接原子吸收(shōu)分光光度法
以銀離子(zǐ)作為氧化劑的間接原(yuán)子吸收分光光(guāng)度法,是利用維(wéi)生素C分子中的有二烯醇基具(jù)強還原(yuán)性,可被硝酸銀氧化為去氫維生素C,同時產生黑(hēi)色銀沉澱
沉澱經離心分離後(hòu),將分離得到(dào)的(de)沉澱用硝酸溶解後,再利用(yòng)原子吸收分光(guāng)光度計測定銀離子的含量,從而接測得維生素(sù)C含量,具體測定方法如(rú)下(xià):
配製一係列濃度的維生素C標(biāo)準溶液,依次吸取一定量的維生素C標準溶液置於10mL離心管中,分別加入2mL(1mg/mL) Ag+標準溶液,然後加水使總體積為4mL,搖勻,在室溫下避光放置35min離心分離(lí)棄去上清液,用(yòng)2mL超(chāo)純水洗滌沉澱(diàn)3次,然(rán)後用l:1的濃硝酸(suān)3mL溶解(jiě)沉澱,移入50mL的容量瓶中,加(jiā)水稀釋至刻度。噴入(rù)空氣-乙炔火焰分別(bié)測定(dìng)其吸光度,以維生素C標準溶液的濃度為橫坐標,以測(cè)得的吸光度值為縱坐標繪製標準曲線。最後將處理過的待測樣按上述方法測(cè)定其維生素C含量。
上述方法巾維生素C標準溶液及樣品(pǐn)的配製都是(shì)利用(yòng)2%的檸檬酸作為溶(róng)劑,並在棕色瓶中保存,原因是維生(shēng)素C在溶液中不(bú)穩定,遇氧氣、光、熱、堿性物質(zhì)易受破壞,而在(zài)適當(dāng)的(de)酸性條件下比較穩定,用2%的檸檬酸溶液(yè)來配製維生素C標(biāo)準溶液(yè),減緩了維生素C被氧化的速度,同時消除了一定外界因素的十(shí)擾,使(shǐ)得測定結(jié)果比較穩定(dìng)。
1.2 以銅離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法
文獻中報道了以銅離子作為氧化劑的間接原子(zǐ)吸收分光光(guāng)度法。該方法也是利用維生素C在酸性介質中維生素C可將Cu2+定量的還原為Cu+,然後Cu+與SCN-反應生(shēng)成CuSCN沉澱,在高速離心機下有(yǒu)效(xiào)地(dì)分離出(chū)CuSCN沉澱,洗滌後再經濃硝酸溶解,用原子吸收法測定沉澱中的含銅量,即可推知樣品中維生素C的含量。具體測定方法如下:
分別吸取1mL配製(zhì)的含一定量維生素(sù)C的標準(zhǔn)溶液(隨配隨用(yòng))(分別(bié)含維生(shēng)素C 50、100、200、300、400、500 µg)和樣品提取液,依次放置於已編號的15mL離心管中,各加(jiā)入1mLCuSO4飽和溶液、1mL濃度為2%硫氰酸銨溶液、0.5mL鹽酸-醋酸鈉緩衝液和(hé)0.5 mL飽和NaCl溶(róng)液充分混和,稍後離心分離,棄去(qù)上(shàng)層清液,小心地用少量水洗滌沉澱2~3次(注意每次用水(shuǐ)不(bú)能超過1 mL),加入0.5mL硝酸溶解後,轉移至lO0mL的容量瓶中加水定容至刻度線,搖勻。分別用原(yuán)子吸收分光光度(dù)計測定其(qí)含(hán)銅量,由所得的維生素C含量的標準曲線,可以得到相應樣品的試驗結果。
該方法所得的試驗結果相對標準偏差RSD在(zài)5%以內加標回收率在96.56%~100.67%,其(qí)精密度和準確度均達到痕量分析要求(qiú)。此方法的(de)線性相關(guān)係數R=O 9989,表明相(xiàng)關性很好。
2紫外可見分光光度法
利用紫外分光光度法(fǎ)測定維生素C的含量是基於維生素c在(zài)紫外光區有特征吸收(shōu),但是因為維生素C結構中具(jù)有(yǒu)不飽和鍵,具有(yǒu)還原性,不(bú)易穩定存在,直接測定誤差較大。所以在(zài)利用紫外分光光度法測定(dìng)時,維生素標準溶液和待測樣的(de)配製條(tiáo)件非常(cháng)重要。曾(céng)國富,黃玉英研究發現,維生索C在CTAB-C5H11OH-H2O微乳液體(tǐ)係中非常穩定,它存在於微乳液滴膜的內側,與滲(shèn)透進入液滴膜(mó)外側的溶(róng)液氧接觸的機會極少(shǎo),該體係能極大地提高維生素C的穩定性。
鄭京(jīng)平等利用維生素C具有對紫外產生吸收和對堿穩定的(de)特性,建立了(le)紫(zǐ)外分光(guāng)光度(dù)快速(sù)測定水果(guǒ)、蔬菜維生素c的新(xīn)方法。根據(jù)維生素C具有對紫外產生吸收和對堿不穩定的特性,於波長243nm處測(cè)定(dìng)樣品溶(róng)液與堿處理樣品兩者吸(xī)光度(dù)之差,通過(guò)查校準曲線(xiàn),即可計算樣(yàng)品巾維生素C的含量。此法(fǎ)操作簡單、快速準確、重現性好,結果令(lìng)人滿意。特別適(shì)合含(hán)深色(sè)樣品的(de)測(cè)定。實驗結果表明該方法簡單(dān)易行,結果準確、靈敏度高,檢出(chū)限低,可快速測定(dìng)水果、蔬菜中(zhōng)維生(shēng)素C,值(zhí)得推廣應用(yòng)。
張立科等介紹了在0~450µg/mL線(xiàn)性範(fàn)圍內,以(yǐ)cu2+作催化劑,以溶解氧將還原型維生(shēng)素C氧化(huà)為在246.0 nm處無吸收(shōu)的(de)氧(yǎng)化型Vc,實現了樣品各紫外幹擾成分的本底(dǐ)校正,建立了種測(cè)定果蔬Vc的新方法(fǎ)。該方法中維生素C破(pò)壞條件(jiàn)的選擇尤為重要,確定(dìng)條件為:Cu用量為30 g,反應(yīng)溫度為70℃,反應時間為20min,加熱條件下,反應速(sù)度快,無需加掩蔽劑。方法簡便、快速、準確,測(cè)定了香蕉、西紅柿等果蔬中(zhōng)的VC含量,結果令(lìng)人滿意。經多次實驗得出該方法RsD在(zài)0.32%~0.89%之間,實際測定了香蕉、西紅柿等樣品中的VC的含量,檢出限為0.2791g/mL,加標回收率在97.16%~100.18%之間 。
3高效液相色譜法
前麵介紹的方法由於在使用(yòng)中有一定的限製,操作複雜、前處理較麻煩。因此在使用中有較大的局限(xiàn)性,目的(de)已(yǐ)逐漸被高(gāo)效液相色譜法所(suǒ)取代。HPLC法具有檢測速度快、操作簡單、實驗結果可靠等特點。
王豔(yàn)穎,薑國斌等(děng)采用HYPERSIL-C8fz譜柱(zhù)、濃(nóng)度0.1%的(de)草酸作流動相的(de)高效液相色(sè)譜(pǔ)法,分析(xī)了草莓中(zhōng)的維(wéi)生素c含量,取得了(le)理想的效果。HPLC檢測條件如下:
流(liú)動相0.1%草酸溶液(yè),流速1.0 mL/min;檢測波(bō)長254 nm,進(jìn)樣量5µL,柱箱溫度(dù)3O℃。該方法分析中受樣品中其他雜質的影響較小。測定草莓中維生素C的含量,回收率為97.4%~102.1%,說明該方法具有所需試劑少、穩定、操作簡便等特點。精(jīng)密(mì)度實驗的相對(duì)標準偏差小於(yú)3%,說明該方法重複性(xìng)和再現性都是比較高的。
陳昌雲(yún)等采用0.05 mol/L磷酸二氫鉀緩衝液:甲醇=80:20(v/v)作流動相。流速為1.0 mL/min,二極管陣列檢測器(qì),檢測波長(zhǎng)為254 nm。測定蜜柚中維生(shēng)素(sù)C含量在質量濃度為20~100mg/L範(fàn)圍內有良(liáng)好的線(xiàn)性關係,方法回收率為92.4%~107.5%,相對(duì)標準偏差(chà)小於(yú)2%。
4 結語
測定維生(shēng)素(sù)C含量方法很多,各種方法各有優缺點,因為維生素C自身的不穩定,導致了很多方法測定結果(guǒ)誤差較大(dà),所以對維生(shēng)素C穩定存在條件的(de)探索非常重(chóng)要。高效液相色譜法因為測定較準確、靈敏度高、選擇性好,有較好的發展前景,是目前(qián)發展較快的一種方法。
本文關鍵詞:維生素C含量(liàng)的檢測方法