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分光光度計測量誤差來源簡述
時間(jiān):2014-10-23 17:27:17 作者: 來源(yuán):轉載 點(diǎn)擊:1430次

儀器本身性能帶來的(de)誤差(chà)

1.1複色光對比耳定(dìng)律的偏離


比(bǐ)耳定律成立的前提條件是人射光是單色光,但是精度再高的儀器,即使是雙單色器的分光光(guāng)度計,也隻能獲得近乎單色(sè)的光(guāng),無法獲得純單色光,它仍然含有狹窄(zhǎi)光通帶,具有複色(sè)光的(de)性質。而複色光會導致比耳定律的正或負偏離。固定(dìng)狹縫的紫外分光光度計光譜帶寬一般為1nm或2nm,可調狹縫的可以做到0.Inm;可見(jiàn)分光光度計帶寬6nm、snm,甚至十幾納米。光(guāng)譜帶寬應該是越小越好,但是隨著光譜分辨(biàn)率的提高,儀器的靈敏度降(jiàng)低,所以選擇儀器時要綜合考慮各(gè)種條件的影(yǐng)響。當溶液濃度較小且單色光較純時(shí),可近似認(rèn)為符合比耳定律(lǜ)。


1.2雜散光的影響


雜散光是指(zhǐ)進人(rén)檢測器的處於待測(cè)波長光譜帶寬範圍外的其他波(bō)長組分,它(tā)是光譜(pǔ)測量中誤差的主要來源(yuán)。產生原因(yīn)有:分光光度計的色散(sàn)元件、反射(shè)鏡、透鏡及單色器內壁灰塵等。在分光光度計工作波段邊緣波長處,由於單色器透光率、光源輻射強度、檢測器靈敏度都較低,雜散光的影響更為顯著。雜散光限製(zhì)儀器的分(fèn)析上限可引起嚴重的(de)測量誤差,實際工(gōng)作(zuò)中,在定量分析時,一般在吸收峰或(huò)其附近處測(cè)量樣品吸光度,如果在分析波長處含有雜散光,這時樣品的透光率較(jiào)小,而雜散光大部分(fèn)透過,使測量吸光度低於真實(shí)吸光度。


1.3儀器噪聲對測t的影響


儀器噪聲也是儀器的(de)一個重要指標,它表征儀器做稀溶液(yè)的能力。是(shì)疊加在(zài)待測(cè)量的分(fèn)析信號(hào)中的不需要的信號,掃描100%T和0%T線,可觀察到分(fèn)光光度計的絕對噪聲水平,如果儀器噪聲較大,會掩蓋(gài)較小的測量信號,一般用噪音(yīn)的二(èr)倍來表示儀器的靈敏度。


1.4波長和吸光度(dù)準確度


樣品的每一個值都是在一定(dìng)的波長下(xià)測得的,如果波長誤差很大,測出的值肯定不準。吸光度準確度也是用(yòng)戶對儀器的(de)直接要求,更應引(yǐn)起(qǐ)足夠的重視。國家計量檢(jiǎn)定規程規定雙光束紫外可見分光光(guāng)度計透射(shè)比準確度為A級士0.6%, B級(jí)土(tǔ)1.0%。


2測量條件(jiàn)的選擇


2.1參比溶液和溶荊(jīng)的選擇


分(fèn)光光度計的測量實際上是以通過參比池(chí)的光強度作為人射光強度來測定試樣的吸光度,先調(diào)節儀(yí)器使透過參比池溶液的吸光度為零,然後讓同一束光通過樣(yàng)品,使得吸光度比較真實地反映待測物質的濃度,所以參比溶液的選擇非常重要。如果僅有待測物(wù)質與顯色劑的反應產物有吸收(shōu),可用純溶劑或蒸餾(liú)水作參比溶液。如果(guǒ)顯色劑有顏色,並在(zài)測定波長下有吸收,則用顯色劑(jì)溶液作參比溶液(yè),所加(jiā)人顯色劑及其它試劑的量,與(yǔ)試樣中的加入量應一致。如果樣(yàng)品中其它組分本身的顏(yán)色對測定有幹擾,而所用顯色劑沒顏色(sè),則用不(bú)加顯色劑的(de)樣品溶液作參比液。


正確選擇合適的溶劑,對提(tí)高分析的準確度起重要(yào)作(zuò)用(yòng)。為減小溶劑中雜質的影響,應(yīng)選擇(zé)高純度的溶劑;溶劑應不與待測物質發生化學反應;待測物在溶劑中要有一定的溶解度;在測定的波(bō)長範圍(wéi)內,溶劑本身沒有吸收(shōu),注意常用(yòng)溶劑的最短可用波長;當用揮(huī)發性大的溶劑時(shí),測量過程中吸收池應加蓋。


2.2測試波長的選擇


當用分光光(guāng)度計對溶液進行測定時,首先需要選擇合適的測量波長(zhǎng)。選擇(zé)的依據是該被測溶液的吸收曲線。在一般情況下,91视频网站入口總是選擇最大吸收波長作(zuò)為測量波長,這樣可以提高靈敏度。而(ér)在有些情(qíng)況下最大(dà)吸收峰很尖銳、吸(xī)收過大或附近有幹擾存在(zài),就不能選最(zuì)大吸收波長(zhǎng),而必須在保證有一定靈敏度的情況下,選擇吸收曲線(xiàn)中的其它波長進行測(cè)定(曲線較平坦處對應的波長),以消除幹擾。繪製吸收曲線是正確選擇波(bō)長的有效手段和方法


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